cariótipo

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Eu- Introdução :

Citogenética é a disciplina médica que estudos cromossómico anormalidades nas doenças genéticas constitucionais e cancros. A enumeração correto de cromossomos humanos estabelecida somente 1956 marcou sua partida. A introdução de técnicas de bandas cromossómicas, em seguida, as técnicas de hibridação in situ e agora microarrays genómicos permitiu um desenvolvimento considerável de citogenética que se tornou um elemento importante na abordagem de diagnóstico, na avaliação do prognóstico e risco de recorrência destas doenças.

II- definição :

O termo refere-se ao cariótipo digital e análise estrutural do conjunto de cromossomas de uma célula ou de um indivíduo .11 é específica para uma dada espécie.

III- Realização do cariótipo :

O cariótipo humana é realizado em laboratórios citogenéticos de diferentes tecidos ;

UMA- arrecadação :

Depende da indicação do cariótipo.

1- no pré-natal :

Foram amostrados idade de gravidez :

  • vilo corial (choriocentèse) ;entre 8th e 10th semana de amenorréia (SA).
  • O líquido amniótico (amniocentese) entre 15th e I7th SA.
  • sangue fetal (cordocentèse) para 20th SA

2- A pós-natal :

O cariótipo é determinado no sangue venipunctura linfócitos.

B- a técnica :

O cariótipo é feito em células nucleadas capazes de divisão in vitro : "Princípio de técnicas de cultura de células"

A técnica convencional é como se segue :

  • amostragem de sangue venoso ( linfócitos).
  • Cultivadas num meio contendo um agente mitogio o passo phytohémagglutinine.cette requer asséptica rigorosa porque alguns microorganismos pode alterada cultura celular. Devemos também ter em conta o meio de cultura, você PH, de T °, para alcançar o cultivo ideal.
  • Incubação 48 para 72 horas (tempo para ter cellues suficientes actual divisão).
  • Bloqueio metaphase divisão (fase ou cromossomas são fundidas com o máximo) colchicina, o que impede a formação do fuso mitótico e centrómeros bloqueadores.
  • Realização de um choque hipotónico utilizando uma solução diluída que causa o inchamento e lise de linfócitos libertando cromossomas em meta
  • fixação cromossomos
  • espalhando slides.
  • Marcação de cromossomas (bandas) e colorir ( padrão de cor e as marcações L, R,Q,T,…
  • Leitura lâminas de microscópio.
  • Ordenação de cromossomas .

IV- A classificação de cromossomas :

O cariótipo humano tem 46 dividido em cromossomos 23 pares,22 par são idênticos em homens e mulheres e são chamados autossomos, o par restante é representado pelos cromossomos sexuais nomeados são gonosomes :
– Os cromossomos XX em mulheres.
– cromossomos XY em humanos.

A classificação destas cromossomas baseia-se em dois critérios, que são:

  • O comprimento relativo de cromossomas que lhes permite em três grupos :
  • pequeno
  • meios
  • grande
  • eu’índice centromérico qu’nós notamos isso

Ic = P(comprimento do braço curto) / P + q (comprimento total do cromossoma)

Com base neste índice estava :
Ic aproximadamente igual a 0,5 : falamos do cromossomo metacentric
0,25 < o < 0,5 : falamos de submétacentrique.
Ic < 0, 10 : nós vamos falar sobre’acrocentrique.

A partir desses fatos que classificar os cromossomos em sete grupos, em ordem decrescente de tamanho 1 para 22 :

  • Um grupo : grande metacentric (1,3) e submétacentrique( 2)
  • grupo B : grandes submetacêntricos ( 4,5 )
  • grupo C : meios metacêntrica e submetacêntrico ( 6,7, 8,9,10,11, 12, X )
  • grupo D : grandes acrocêntricos ( 13, 14, 15 )
  • grupo E : pequena metacêntrica ou submetacêntricos ( 16,17,18 )
  • grupo F : crianças metacêntricos ( 19, 20 )
  • grupo G : pequena acrocêntrico ( 21,22, e )
Os cromossomas são contados e classificados por tamanho decrescente

Técnicas recentes de rotulagem identificar cada par de cromossomas de alternados faixas claras e escuras ;estas bandas estão listados em um braço Nomenclatura cromossoma internationale.Chaque é dividido de acordo com o seu tamanho em 1 para 4 regiões,cada região bandas e sub bandas numerados a partir do centrómero ao dos telómeros exp 6 p21,2;significa que a segunda sub-banda da primeira banda da região 2 o braço curto do cromossomo 6 e decide:

As bandas de numeração

Seis por dois-dois-pontos.

  • Várias técnicas de marcação são usadas:

1- bandas G (desnaturação enzimática) :

As lâminas que são fixados nos cromossomas são embebidos em tripsina;não há desnaturantes partes do cromossoma que se tornam quase branca, enquanto as porções não-desnaturada são noires.les bandas escuras correspondem a sequências de DNA rico em A-T baixo em genes activos.

2- R fita (reveses):a marcação é obtido por desnaturação pelo calor.

As bandas obtidas são o inverso do que os obtidos com os trypsine.Les bandas escuras correspondem a sequências de ADN rico em G-C ,rica em genes activos.

Tiras de L e R

3- bandas C (a coloração com o sulfato de bário) :

Para visualizar heterocromatina regiões do cromossoma y centroméricas.

4- bandas T(impulso desnaturação térmica) :

Para visualizar os telômeros .Depois de desnaturação , cromossomas são classificados e classificados analysés.Le pares de cromossomas resultados no cariótipo do indivíduo que é possível inferir a fórmula cromossómico de acordo com uma nomenclatura bem definida :

Indica-se sucessivamente,você cromossomos nome cheias ;seguido por uma vírgula,cromossomos sexuais ; outra anomalia cromossómica ponto e quando ela existe. Expie:
– homem normal cariótipo :46,XY cad 46 cromossomas / célula não faça un cromossoma X et un cromossoma Y.
– trissomia 21 : 47,XY,+21 cafajeste 47 cromossomas / célula não faça un cromossoma X et un cromossoma Y,mais cromossomo 21 excedente.
– Translocação: 46,XX,t(eu;18) cafajeste 46 cromossomas / célula incluindo dois cromossomas X e uma translocação entre os cromossomas 1 e cromossomo 18.

V- indicações cariótipo :

UMA- PRÉ-NATAL PERÍODO :

– idade materna avançada (> 38 anos).
– estrutura anomalia cromossómica de um dos pais.
– Antecedente para o par grávida com cariótipo anormal.
– Sinais de’chamada de ultrassom

B- período pós-natal :

1- no momento do nascimento :

– Antes de um sugestivo quadro clínico de anomalia cromossômica conhecida.
– Na frente de uma síndrome malformação difícil de diagnosticar.
– Durante ambiguidade sexual,

2- visita’criança e eu’adolescente :

frente:
– transtornos do desenvolvimento sexual e crescimento.
– retardo mental e distúrbios comportamentais. c-Em adultos
– Os pais ou da criança da família com uma anormalidade da estrutura dos cromossomas.
– Casal tendo tido vários abortos.
– história pessoal ou familiar de morte fetal ou malformações réccurente.
– Balanço antes de procriação medicamente assistida.

C- INDICAÇÕES de câncer em CARIÓTIPO :

A principal indicação do cariótipo é o diagnóstico de certas doenças cancerosas em particular doenças malignas hematológicas .11 também pode ter um valor prognóstico e constituiu um marcador de progressão tumoral.

WE- As anormalidades do cariótipo :

UMA- números anormais :

1- as aneuploidias :

Eles resultam numa alteração no número total de cromossomas .A trissomia mais comum e monossomia.

uma- trissomias :

Foram os mais anormalidades cromossômicas comum em humanos,eles são definidos pela presença de um cromossomo três exame de cariótipo extra de agradar Eu, então, inclui 47 .Touts cromossomas cromossomas pode ser afectada e a maioria das trissomias provocar abortos precoces,néaumoins , titulares de trissomias gonosomal (47,XXX;47,XXY;47,XYY) ou trissomia 21 são viáveis ​​a longo prazo.

b- a monossomia :

Falta de chromosome.La única monosomy viável é monossomia X ou síndrome de Turner.

2- Les polyploidies :

O número de cromossomos é um múltiplo do haplóides (23)

– 3x lote haploïde = 69 cromossomas = Triploidie.
– 4x lote haploide = 92 cromossomas = tétraploidie

nos seres humanos , essas anomalias são raramente viável e é possível detectar em alguma célula cancerosa.

B- Anormalidades da estrutura :

1- La translocação :

Existem dois tipos :

  • translocação recíproca
  • robertsonienne translocação

uma- translocação recíproca :

Resultado de’troca de um fragmento de cromossomo entre dois cromossomos não homólogos,este translocação dá origem a dois derivados.

translocação recíproca

b- robertsonienne translocação :

C’é a fusão de dois cromossomos acrocêntricos em seu centrômero; o cariótipo mostra um número de cromossomos menor ou igual a 45 Apesar’ele n’não há diminuição no número de cromossomos.

o mais translocação t Robertsonian comum(13,21)

robertsonienne translocação

2- eliminações :

C’é a perda de’um fragmento de um cromossomo. a expressão fenotípica depende do tamanho e da riqueza do gene do segmento excluído .11 dois tipos:

uma- terminal :

No final de um cromossoma.

deleção

b- intersticial :

No interior de um braço dos telômeros de cromossomos são respeitados .o.

deleção intersticial

3- La duplicação :

Um cromossomo é duplicado parte .Esta voltou trissomia partielle.l'expression fenotípica depende do segmento duplicado.

Duplicação

4- eu’inversão :

C’é a rotação de 180 ° de um fragmento de cromossomo resultante de duas quebras no mesmo cromossomo. Existem dois tipos

uma- reversão pericêntrica :

Os dois break points estão em dois braços diferente do cromossoma;portanto inversão interessado em centrômero.

reversão pericêntrica

b- paracentrique inversion :

Os dois break points estão no mesmo braço cromossomo, a inversão não envolve o centrômero

paracentrique inversion

5- O anel cromossoma :

C’é o resultado de duas deleções terminais ocorrendo no mesmo cromossomo l’um no braço p l’outro no braço q resultando na soldagem das extremidades do segmento cêntrico e na perda dos segmentos excluídos.

cromossomo anel

6- eu’isocromossomo :

Este é um cromossoma consiste em duas identiques.Au braço em vez de ter um braço curto e um braço cromossoma longje tem dois braços curtos e dois braços longs.L'isochromosome o mais frequente é o isocromossomo o braço longo do cromossoma X

isocromossomos

observação :

As anomalias são ditas homogêneas quando todas as células nucleadas do’indivíduo tem a mesma fórmula cromossômica.

– As anomalias são chamados mosaico quando coexistem no mesmo indivíduo pelo menos duas populações de células de diferentes fórmulas cromossómicas .A partir do ponto de vista Nomenclatura ;as diferentes populações de células são indicados, uma após a outra e separadas por uma barra diagonal.

Exp:46,XX / 47, XX ,+21

Curso do Dr. Hannachi – Faculdade de Constantino