యొక్క పద్ధతులు’సెల్ అధ్యయనం

0
12249

పరిచయం :

సెల్ l’జీవుల యొక్క ప్రాథమిక నిర్మాణ మరియు క్రియాత్మక యూనిట్ మరియు దాని చిన్న పరిమాణం కారణంగా, కణ జీవశాస్త్రం. అన్ని డి’మొదటి, అవసరం’మంచి నాణ్యత గల చిత్రాన్ని పొందండి ; దీనికి అభివృద్ధి అవసరం’సూక్ష్మదర్శిని వంటి సాధనాలు మరియు కాలక్రమేణా పరిపూర్ణంగా ఉన్న తగిన పద్ధతులు.

సూక్ష్మదర్శిని రెండు ప్రధాన సమూహాలుగా విభజించబడింది, చేరి ప్రాథమిక కణ స్వభావం భిన్నంగా : ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని, కూడా తేజఃఖండముల అని, ఎందుకంటే’ఇది ఫోటాన్లు మరియు ఎలక్ట్రాన్లను అధ్యయనం చేయడానికి ఎలక్ట్రాన్లను ఉపయోగిస్తుంది’వస్తువు.

కోసం’చక్కని వివరాలను కూడా గమనించండి, మేము స్పష్టత పెంచుకోవాలి, ఇది సాధారణంగా పొడవుకు అనులోమానుపాతంలో ఉంటుంది d’అధ్యయనం చేసిన నిర్మాణాలకు ఆటంకం కలిగించే రేడియేషన్ తరంగం.

వారి తీర్మానానికి మైక్రోస్కోపుల రెండు ప్రధాన రకాలు ఉన్నాయి : ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని మరియు ఎలక్ట్రానిక్ మైక్రోస్కోప్ లు.

ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని :

ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని (కాంతి లేదా తేజఃఖండముల) l ని అనుమతించండి’జీవన లేదా చనిపోయిన కణాల పరిశీలన, స్థిర సన్నాహాలు చాలా సన్నని భాగాలను ద్వారా, ఇది కణాలు లేదా కణజాలాల యొక్క సాధారణ వీక్షణను ఇస్తుంది మరియు అనుమతిస్తుంది’జీవన కణాల పరీక్ష.

ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని కనిపించే కాంతి ఉపయోగించడానికి మరియు తేలికపాటి సూక్ష్మదర్శిని యొక్క పరిష్కరించడమే విద్యుత్తు సైద్ధాంతిక పరిమితిని చేరుకునే 0.2 pm, మాగ్నిఫికేషన్ ఉండటం గరిష్ట x1000.

వ్యాఖ్య : దశ విరుద్ధంగా సూక్ష్మదర్శిని ఒక ఉదాహరణ కోర్సు చూపుట సమయంలో అభివృద్ధి చేయబడింది.

మూర్తి 3. చిత్రాలు పోలిక ఒక సాధారణ కాంతి సూక్ష్మదర్శిని తో పొందిన (ఎడమ) మరియు ఒక దశలో విరుద్ధంగా సూక్ష్మదర్శిని తో (కుడి) మెటీరియల్స్ కృత్రిమంగా రంగు కాదు : మూత్రపిండ సూక్ష్మ నాళిక క్షీరద కోతలు అడ్డంగా.

ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని :

– ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని యొక్క కిరణాలను ఉపయోగిస్తుంది’ఛార్జ్ చేయబడిన ఎలక్ట్రాన్లు, ద్రవ్యరాశి కలిగివుంటాయి ఒక తరంగం వలె పని. ఎలక్ట్రాన్లు ఎంత ఎక్కువ వేగవంతం అవుతాయో, పొడవు ఎక్కువ d’వేవ్ తగ్గుతుంది మరియు రిజల్యూషన్ పెరుగుతుంది. ఈ సూక్ష్మదర్శిని విద్యుదయస్కాంత లెన్సులు కలిగి ఉంటాయి. ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని యొక్క పరిష్కరించడమే శక్తి 0,2 nm మరియు ఉంది 1 000 ఆప్టికల్ సూక్ష్మదర్శిని కన్నా ఎక్కువ సార్లు, మాగ్నిఫికేషన్ x అత్యంత ఉండటం 100 000.

మూర్తి 1. ఒక కాంతి సూక్ష్మదర్శిని మరియు ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని లో కాంతి కిరణాలు మరియు ఎలక్ట్రాన్ల మార్గాలు పోల్చడం రేఖాచిత్రాలు.

వ్యాఖ్య : స్కానింగ్ ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని యొక్క ఒక ఉదాహరణ కోర్సు చూపుట సమయంలో అభివృద్ధి చేయబడింది.

సెల్ మైక్రోస్కోపిక్ పరిశీలన :

సెల్ పరిశీలన రెండు స్థాయిలలో జరుగుతుంది ; బయట మరియు లోపల.

అంతర్గత సమ్మతి తో సెల్ :

ఒక- తయారీ పద్ధతులు కోసుకుంటాడు :

ఎలక్ట్రాన్ల శక్తి చొచ్చుకుపోయే తక్కువ కారణంగా, గమనించిన వస్తువులు చాలా జరిమానా ఉండాలి (కోతలు 50 కు 80 nm), నిర్దిష్ట నమూనాలను సాంకేతిక కటింగ్ అవసరం.

చేసినప్పుడు జీవ పదార్థం ఘన (జంతు కణజాలం లేదా మొక్క : foie, మెదడు, కండరాల…, లేదా కాండము, షీట్, RACINE…), మీరు మొదటి సన్నని ముక్కలు మరియు సాధారణ గా కట్ చేయాలి, అప్పటి రంగులు చేయబడుతుంది. ఒక సెల్ లో 20 pm వ్యాసం, ఛార్జ్ చేయవచ్చు 200 కు 400 కూపెలతో ultrafines.

పరిశీలన కాంతి సూక్ష్మదర్శిని లేదా ఎలక్ట్రానిక్ కింద చేపట్టారు మేరకు ఈ ప్రోటోకాల్ వివిధ దశలను.

కాంతి సూక్ష్మదర్శిని ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని
ఫిక్సేషన్ : వారి అంతర్గత నిర్మాణాలు వీలైనంత తక్కువ మారుతున్న సమయంలో లక్ష్యాలు కణాలను హతమార్చే. ఈ ప్రయోజనం వివిధ మిశ్రమాలకు వాడిన, సహజ గుణాన్ని పోగొట్టడానికి తెలిసిన పదార్థాలు కలిగి మరియు తప్పనిసరిగా ప్రోటీన్లు చెంది : ఆమ్లాలు, ఆల్కహాల్, aldehydes, కొన్ని లవణాలు… ఈ ఫిక్సర్స్, అన్నారు coagulants, తరువాత ఉపయోగిస్తారు రంగుగా విశ్లేషించారు జీవ పదార్థం యొక్క స్వభావం మరియు రకం స్వీకరించారు ఉండాలి.
వేడి, మద్యం, ఫార్మాల్డిహైడ్…. glutaraldehyde, ద్రవాభిసరణ యాసిడ్….
నిర్జలీకరణ : చేర్చాలని ఉపయోగించే ఒక ద్రావకం మాధ్యమమైన నమూనా నుండి నీటి తొలగించి దాన్ని స్థానంలో అనేది ; ఇది పెరుగుతున్న ఏకాగ్రత ఆల్కహాల్ లో స్నానాలు వరుస కలిగి. ప్రతిక్షేపణ కణజాలం వైకల్పము దారి లేదు కాబట్టి ఈ ఆపరేషన్ క్రమంగా ఉండాలి. తుది స్నాన పొందుపరచడానికి మీడియం ఒక మద్యం / సేంద్రీయ ద్రావకం మిశ్రమం లో నిర్వహిస్తారు, చివరికి నమూనా వద్ద రావడానికి ఆ స్వచ్ఛమైన ద్రావకం లో కలిగి : జైలేన్, టౌలేనే…
చేర్పును లేదా కోటింగ్ : లక్ష్యాలు పూర్తిగా ఒక గట్టిపడే పదార్థం యొక్క కణాలు పిండోత్పత్తి వరకు, జరిమానా కట్ మరియు సాధారణ అనుమతిస్తుంది. ఈ పదార్ధం, అణువులు నిజానికి అసలు నీటి అణువులు భర్తీ, తరచుగా ద్రవ ఇది మైనం లేదా జిగురు రెసిన్ 60 ° C మరియు గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద ఉంటుంది ; ద్రావకాలు కరిగే పైన పేర్కొన్న, అది కణజాలాలు లోకి చాలా సులభంగా చొచ్చుకొచ్చే. అనేక స్నానాలు తరువాత 60 ° C మరియు రెసిన్ క్యూరింగ్, మేము పొందుటకు సరిగా కట్ చేయవచ్చు మరియు కూడా నమూనా నిల్వ మాధ్యమంగా పనిచేస్తుంది ఒక "బ్లాక్".
మైనము కృత్రిమ ఎపోక్సీ
Coupe : లక్ష్యాలతో వస్తువు యొక్క సన్నని మరియు పారదర్శకంగా విభాగాలు ఉత్పత్తి. ఒక కణముల కోయు సూక్ష్మ కాంతి సూక్ష్మదర్శిని కోసం ఉపయోగిస్తారు, ఒక మెటల్ రేజర్ తో అందించిన, సీరియల్ విభాగాలు ఇవ్వడం ; వీటిని గ్లాస్ స్లైడ్‌లపై జెలటిన్ ద్రావణంతో అతుక్కుంటారు, ఎండబెట్టి మరియు ఎక్సేలెనీ లేదా టౌలేనే తో deparaffinized. బ్లేడ్ మిగిలిన విభాగం మాత్రమే సేంద్రీయ పదార్థం.
– రాస్సోయిర్ రకం మెటల్ బ్లేడ్ మైక్రోటోమ్ - యొక్క క్రమం 5 a7mm – గ్లాస్ లేదా డైమండ్ స్లైడ్ అల్ట్రామిక్రోటోమ్ – ఆఫ్ ది ఆర్డర్ ఆఫ్ 0.1 pm మరియు తక్కువ
రీహైడ్రేషన్ : ఈ తగ్గుతూ శీర్షికలు ఆల్కహాల్ వరుస ఉపయోగం అవసరం, నీటిని పొందడానికి.
రంగు : జీవ నమూనా యొక్క వైవిధ్యభరితమైన వివిధ ప్రాంతాల లేతరంగు అనుమతిస్తుంది.

  • కాంతి సూక్ష్మదర్శిని కోసం ఉపయోగించే అన్ని రంగులు నీటిలో కరిగే వారు నమూనా కలరింగ్ ఉంటాయి మరియు కాంతి ప్రసారానికి వీలు.
  • ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని కోసం ఎలక్ట్రాన్లు మరియు జీవ ఉపరితలాల మధ్య తక్కువ సంకర్షణ ఫలితంగా తక్కువ విరుద్ధంగా విస్తరించేందుకు ఉపయోగిస్తారు భారీ లోహాలు ఉంది.
మిథిలిన్ నీలం, తటస్థ ఎరుపు… హెవీ మెటల్ లవణాలు : ప్రధాన సిట్రేట్…

 

మూర్తి 2. సారాంశం కోతలు తయారీ విధానం.

పరిశీలన పద్ధతులు B-రూపాలు మరియు సెల్ ఉపరితలాలు :

చాలా చిన్న పరిమాణాలతో నమూనాలను మరియు వస్తువులు ఉన్నాయి, సాపేక్షంగా సాధారణ రూపం (అణువుల, వైరస్ లేదా వివిక్త సెల్యులార్ భాగాలు : OU d'అవయవాలు శకలాలు అవయవాలు) పీచు నిర్మాణాలు విషయంలో ఎటువంటి కట్ అవసరం చాలా జరిమానా వివరాలు (ప్రోటీన్ protofilaments, ఫ్లాగెల్లాల, కొన్ని తోక వైరస్…). ఈ ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోప్ ప్రసార పరిశీలన విరుద్ధంగా లేకపోవడం ఒక సమస్య విసిరింది, దీనిలో మేము ఈ రెండు పద్ధతులు ఒకటి ఉపయోగించి పరిష్కరిస్తారు :

1- కలర్ నెగటివ్ : 2- METAL SHADE :
ప్రిన్సిపీ : ఒక మద్దతు పరిశీలిస్తే వస్తు జమ ఉంది, అప్పుడు హెవీ మెటల్ యొక్క ఉప్పు ద్రావణంలో అసెంబ్లీ ముంచుతాం, drainée.et ట్రేస్ మూలలు లేదా వస్తువులను అంచులలో పరిష్కారం దృష్టి సారిస్తాడు మిగిలిన ఇది. ప్రిన్సిపీ : ఒక మద్దతు పరిశీలిస్తే వస్తు జమ ఉంది, తరువాత లోహపు ఆవిర్లు అసెంబ్లీ పరిచయం (ఒక లోహ ఎలక్ట్రోడ్ vacuo vaporizing ద్వారా పొందిన) మరియు నీడ కోసం సంభవం యొక్క ఈ కోణం ఏర్పాటు.
మూర్తి 4. ప్రతికూల రంజనం ప్రిన్సిపల్ ఒక పొర క్యారియర్ లో "అద్దకం" మరియు కణాలు లేదా కణాలు చుట్టూ రెండో చేరడం కలిగి ద్రావకం ఆవిరి తరువాత, ఒక వృత్తాన్ని ప్రభావం ఈ అణువులు ప్రతికూల చూడండి సాధ్యమయింది సేకరిస్తుంది, ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని
మూర్తి 5. లోహ షేడింగ్ ప్రిన్సిపల్ సస్పెన్షన్ కణాలు లేదా కణాలను కలిగి ద్రావకం ఆవిరి తరువాత, అవి ఒక పొర క్యారియర్ పేరుకుపోయిన. ఈ ఒక వైపు మెటల్ చల్లడం ఆపరేషన్ vacuo అనుసరిస్తాడు ; ఒక మెటల్ ఈ లీడ్స్ ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీ వద్ద "నీడ" ఒక స్థానికీకరించిన చేరడం ప్రభావం సృష్టిస్తుంది.

భారీ కణజాలం గమనించి చేసినప్పుడు, మరియు ఒక కట్ ఫలితంగా లేని వారి అంతర్గత భాగాలను, కానీ పగులు, మేము ఫ్రీజ్ పగుళ్ళ మరియు cryodécapage మాట్లాడేందుకు.

3- Cryofracture మరియు cryodécapage :

ఈ టెక్నిక్ లోహ నీడ తెలిసిన టెక్నిక్ ఒక అభివృద్ధి పది సంవత్సరాల క్రితం అభివృద్ధి ఏర్పరుస్తుంది, ఇది ప్రధానంగా చాలా చిన్న జీవసంబంధ నమూనాలో చాలా వేగంగా ఘనీభవన ఆధారంగా (తక్కువ 1 mm 3), ద్రవ నత్రజని లో (- 196 ° C). ప్రోటోకాల్ యొక్క కీలకమైన దశ పగులు ఉంది, మరియు స్విచ్చింగ్ కాదు, ఘనీభవించిన నమూనా, మరియు చాలా తక్కువ ఉష్ణోగ్రతల వద్ద ఈ. ఈ ఫ్రీజ్ పగులు నమూనా ద్వారా ఒక అసమాన ఉపరితలంపై వెలువడింది, మరియు అది గమనించిన చేయబడుతుంది ఈ ప్రాంతం.

అప్పుడు sublimating ద్వారా నమూనా యొక్క ఉపరితలం యొక్క లేపన నిర్వహిస్తుంది, వాక్యూమ్ మరియు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత కింద, ఉపరితల మంచు యొక్క పలుచని చిత్రం ; కొద్దిగా ఉపశమనం నిర్మాణాలు పెరుగుదల పై ప్రభావం కలిగి (cryodécapage).

ఇది ఒక మెటల్ నీడతో చేస్తుంది, vacuo మరియు చల్లని, రిలీఫ్ బలోపేతం). ఒక యూనిఫాం కార్బన్ చిత్రం ఆపై జరిమానా లోహ కాని ప్రభావిత ప్రాంతాల్లో బలోపేతం మరియు కవర్ మెటలైజ్డ్ ఉపరితలం పై sprayed ఉంది. మేము నమూనా యొక్క విరిగిన ఉపరితలం యొక్క నిజమైన అధిక నిర్దిష్ట అచ్చు గ్రహించారు : ప్రత్యుత్తరం ; ఇది ట్రాన్స్మిషన్ ఎలక్ట్రాన్ సూక్ష్మదర్శిని లో గమనించవచ్చు ఇది అని. చూడటం ముందు, ఇది ద్రవీభవన ద్వారా నమూనా నుండి టేకాఫ్ ఉంటుంది, శుభ్రం చేయు మరియు చివరకు ఒక ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీ గ్రిడ్ స్థిరపడింది .

మూర్తి 6 : ఫ్రీజ్ పగులు ప్రోటోకాల్ / cryodécapage సమయంలో చిత్రం ఏర్పాటు సిద్ధాంతములో (1) ఉదాహరణకు రెండు proteoliposomes మంచు చేర్చారు. (2) బ్రోకెన్ మంచు గాని పుటాకార భాగం విడుదల (ఎడమ), గాని కుంభాకార భాగం (కుడి) ముతక పొక్కులు. (3) లోహ ప్రతిరూప యొక్క కారక ఏకదిశాత్మక నీడతో తర్వాత పొందిన (బాణం) మరియు కార్బన్ బాష్పీభవన. ఎగువ భాగంలో లేదా అంతర్గత ప్రోటీన్ యొక్క అడుగు పక్క ముద్రణ పగులు ప్రదర్శనలు, రెండపొరలుగల పాతిపెట్టాలి వారి డిగ్రీ ప్రకారం. ప్రస్తుత ప్రాంతం యొక్క మెటల్ ప్రతిరూప మరియు "డొల్ల" లేదా "బొప్పులు", కేసు వంటి.
మూర్తి 7. ఫ్రీజ్ పగులు ద్వారా పొందిన ఛాయాచిత్రాలు (ది) ఎంబెడెడ్ ప్రోటీన్ రెండపొరలుగల కలిగి లైపోజాములు స్వరూపం (proteoliposomes) మరియు ఒక దట్టమైన ఉపరితల కలిగి. (1బి) మాత్రమే లిపిడ్లు కూడి స్వరూపం మృదువైన లైపోజాములు. (2) ఒక జీవ త్వచం యొక్క స్వరూపం (ఒక జెనోపస్ మాతృజీవకణ యొక్క సైటోప్లాస్మిక్ పొర ఇక్కడ ; x75 000).

బాహ్య పరిశీలనలు CELL ఎలక్ట్రానిక్ స్కేల్ :

autoradioaraphie టెక్నిక్ ఆఫ్ :

పరిచయం :

ప్రకృతిలో వివిధ అంశాలు అణువుల సజాతీయ జనాభాను కాదు ; ఐసోటోపులు మిశ్రమం (కార్బన్ ఎలక్ట్రాన్ల అదే నెంబర్ కానీ కోర్ యొక్క వేరొక మాస్ కలిగి). చాలా సాధారణ అంశాలు పాటుగా : 1HJ 12సి, దిN, 160…, స్థిరంగా అరుదైన ఐసోటోపులు విభిన్నంగా ఉంటాయి :2 H, 13సి, 15l l, 1లుది…, మరియు రేడియోఐసోటోప్లను : 3H, లోసి… రెండవది ప్రస్తుతం ఒక నివేదిక ప్రోటాన్ / న్యూట్రాన్ అసమతుల్య న్యూక్లియై, మరియు యాదృచ్ఛిక కణాలు పునఃపంపిణీల్లో ఒక స్థిరమైన రాష్ట్ర లేదని కాబట్టి సంభవించవచ్చు. ఈ చార్జ్ కలిగిన అణువులు లేదా వికిరణ ఉద్గారం కలిసి ఉంటుంది : కెర్నల్ విచ్చిన్నానికి మాట్లాడండి, రేడియోధార్మికత యొక్క దృగ్విషయం ఉంది.

నివసిస్తున్న విషయం నెలకొల్పబడిన అణువుల రేడియోధార్మికత కారణంగా ప్రతికూల ఎలక్ట్రాన్లు ఉద్గారానికి ప్రధానంగా (P- కణాల).

ప్రతి రేడియో ఐసోటోప్ మూడు పారామితులు కలిగి ఉంటుంది :

  1. ప్రసార రకం.
  2. కాలం లేదా సగం జీవితం, సమయం అణువుల కుళ్లిపోతుంది సగం అవసరం.
  3. ఉద్గార యొక్క సరాసరి శక్తి (మెగా ఎలక్ట్రాన్ వోల్ట్స్ వ్యక్తం, లేదా

MeV).

బయాలజీ లేదా సెల్ శరీరశాస్త్రంలో ఉపయోగించే ప్రధాన రేడియోఐసోటోప్లను ఉన్నాయి : 3H – 14సి – 32పి – 35S « 22Na « 42K – 125l. అవి ఒకటి లేదా ఎక్కువ అణువుల రేడియోధార్మిక ఉన్నాయి దీనిలో అకర్బన లేదా సేంద్రీయ అణువుల రూపంలో ఉపయోగిస్తారు ; అవి రసాయనంగా కణాలు ద్వారా ఇతరుల నుండి వేరు కాదు మరియు పూర్తిగా కలిసిపోయారు (శోషిత, జీవక్రియలో మరియు వారి స్వంత విషయం విలీనం).

ప్రిన్సిపీ :

ఆటో రేడియోగ్రఫీ కచ్చితంగా ఒక నమూనా సమతలంలో ఒక రేడియోధార్మిక పరమాణు జాతులు గుర్తించడం అనుమతిస్తుంది. ఈ పద్ధతి రేడియోధార్మిక సమ్మేళనాలు తెరచిచూపబడని ఫోటోగ్రాఫిక్ రసాయనాలు ఆకట్టుకోవడం ఆ సూత్రం ఆధారంగా (ఫిగర్ 8). కణాలు (3 జారీ 3H, ది 14సి లేదా 32పి బ్రోమైడ్ ధాన్యాల లోహ వెండి రసాయనం ఉన్న వెండి తగ్గించేందుకు, కాంతి పద్ధతిలో. కోతలు విషయంలో, రసాయనం నేరుగా గ్లాస్ స్లయిడ్ న వ్రాసాడు నమూనా ఇలా చేస్తున్నారు.

ఒక వేరియబుల్ ఎక్స్పోజరు సమయం తరువాత (కొన్ని రోజుల కొన్ని నిమిషాలు), రేడియోధార్మికత మొత్తం మరియు వాడినఐసోటోప్ యొక్క స్వభావం మీద ఆధారపడి, సున్నితమైన చిత్రం బహిర్గతం మరియు ఒక PhotoPrint పరిగణిస్తారు. obseive న, రసాయనం లో, పార్టికల్ ఎమిషన్ యొక్క ఖచ్చితమైన స్థానం రజత ధాన్యాల చేరడం (లేబుల్ జీవసంబంధ నమూనాలో పైన, ఇది అయిపోతుంది). అధిక రిజల్యూషన్ autoradiography లో, సూక్ష్మదర్శిని కోసం

ఎలక్ట్రానిక్, సాంకేతిక అభివృద్ధి అభివృద్ధి వెండి ధాన్యాలు ఆ ఆకారం నిర్ణయిస్తుంది కార్యరూపం రేడియోధార్మికత (పొడి లేదా రూపం మలుపులను పంక్టాట్ ; చూడండి మూర్తి 9).

మూర్తి 8. autoradiograph సూత్రం

టెక్నాలజీ ఇక్కడ కాంతి సూక్ష్మదర్శిని చికిత్స విభాగాలను వర్తించబడుతుంది.

విశ్లేషించారు కణాలు చొప్పించారు, చికిత్సకు ముందు, ఒక నిర్దిష్ట రేడియోధార్మిక DNA పూర్వగామి (thymidine tritiée), కాబట్టి మాత్రమే కేంద్రకం రసాయనం అభివృద్ధి తర్వాత మార్క్ అగుపిస్తాయి.

(1) లేబుల్ కణాలు కప్పులు ఒక గాజు స్లయిడ్ అతుక్కొని. (2) చీకటిలో ఒక ఫోటోగ్రాఫిక్ రసాయనం తారాగణం.

(3) కణాల స్వరూపం రసాయనం అభివృద్ధి తర్వాత కోసుకుంటాడు.

(ఒక), (బి) మరియు (సి) : ప్రదర్శన సెక్షనల్ సన్నాహాలు 1, 2 మరియు 3 ; (d) : క్లోజప్ రంగం (సి).

మూర్తి 9. లేఅవుట్ autoradiography ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీ ఈ విభాగం ప్రదర్శనలు DNA చేపలు spermatocytes రెండు కేంద్రకాల సంయోజనం. కణాలు tritiated thymidine సమక్షంలో incubated చేశారు ; డబ్బు "గ్రైన్" క్రోమాటిన్ పరిమితం ఉంటాయి.

సెల్యులార్ కణాంగాలలో సాంకేతిక ఒంటరిగా :

1- సెల్ అంశీకరణ మరియు అవకలన అసోసియేషన్ :

కణాంగాలలో వివిధ తరగతులు వారి పరిమాణపరంగా వేర్వేరుగా ఉంటాయి, ఆకృతీకరిస్తుంది
డెన్సిటీ; మొదటి రెండు పారామితులు యొక్క వైవిధ్యాలు చాలా పెద్ద కావచ్చు (కేంద్రకం అందుబాటు 10 వ్యాసం మైక్రాన్ల ribosomes కొలిచేందుకు అయితే 15- 20 nm) సాంద్రతకు సంబంధించిన ఆ తక్కువ ఉన్నప్పుడు (ఆఫ్ 1,1 mitochondria గురించి, lysosomes లేదా peroxisomes, కు 1,6 ribosomes వరకు).

భూమి యొక్క గురుత్వాకర్షణ క్షేత్రంలో, ఈ కణాంగాలలో లేదా నిర్మాణాలు ఆకస్మికంగా ఉన్నాయి
homogenate సస్పెండ్ మరియు ప్రత్యేక భిన్నాలు లోకి సంఖ్య వేరు గెట్స్.
మేము కృత్రిమంగా సెక్యూరిటీ ద్వారా ఈ ఫీల్డ్ యొక్క విలువను పెంచితే, ఈ అణువులు
పెరిగిన వేగం మరియు వారి లక్షణాలు వివిధ ప్రకారం అవక్షేపం
హైడ్రోడైనమిక్, homogenate విడగొడతారు చేయవచ్చు తద్వారా. ప్రాధమిక endpoint
అవక్షేపణ రేటు నిర్ణయించే పొందగలిగారు, కాబట్టి చాలా కణాలు
పెద్ద మరియు homogenate దట్టంగా మొదటి రూపం అవక్షేపం (గుళికల) కలిసి
ట్యూబ్ సెంట్రిఫ్యూజ్ యొక్క దిగువన, చిన్న మరియు మరింత కలిగి పైని తేలెడు ద్రవ
కాంతి. పైని తేలెడు మరియు గుళికల elutriated ఉంటాయి.

మూర్తి 10. అవకలన సెక్యూరిటీ నియమావళి సెల్ అంశీకరణ ప్రారంభ homogenate ఒక కణజాలం తునక నుండి పొందిన (1 కు 3) విడగొడతారు, ద్వారా 4 సెక్యూరిటీ మరింత బలంగా, వరుస 4 బలహీన మారుతోంది కణాంగాలలో లేదా సామూహిక కణాల కలిగి అవక్షేపాలు, మరియు ఏమీ నుండి ఒక ఫైనల్ పైని తేలెడు పాతుకుపోయిన చేయవచ్చు. microsomes (బేస్ 3) సమయంలో కణంలోని కొన్ని పొర వ్యవస్థల విభజన వలన ఏర్పడే చిన్న వెసికిల్స్’సజాతీయీకరణ.

2- డెన్సిటీ ప్రవణత సమతౌల్య టెక్నిక్ :

అల్ట్రా కేంద్రప్రసారకాల సంప్రదాయ కేంద్రప్రసారకాల పైగా అత్యంత అధునాతన యంత్రాలు ; వారి rotors సమీపంలో అప్ చెయ్యవచ్చు 80 000 rpm, మరియు వారు గురుత్వాకర్షణ అప్ ఖాళీలను అందించడానికి 500 000 సార్లు భూమి యొక్క గురుత్వాకర్షణ.

ఈ టెక్నిక్ ఉపయోగాలు, సెంట్రిఫ్యూజ్ ట్యూబ్ లో, దీని సాంద్రత ఒక సమ్మేళనం గాఢత యొక్క నిరంతర వైవిధ్యం టాప్ దిగువ నుండి క్రమం తప్పకుండా తగ్గుతుంది. ప్రవణత నెలకొల్పబడిన పరిష్కారం సుక్రోజ్ ఆధారంగా (preformed ప్రవణత), లేదా CsCl (ప్రవణత autoformé) ; మరియు పరీక్ష నమూనా, ద్రవ ఉపరితలంపై పేరుకుపోయిన.

సూత్రం, కణాలు లేదా పరమాణు జాతులు ఒక్క సాంద్రత ఆధారంగా వేరు. సెక్యూరిటీ సమయంలో, ఈ అవక్షేపం వరకు’ద్రవంలో వాటి సాంద్రత ఉన్న ప్రవణత స్థాయిని చేరుకోవడానికి, మరియు వారు ఒక బ్యాండ్ ఏర్పాటు. ఈ సాధించవచ్చు, అవి సమాన స్థితిలో ఈ స్థానం నుండి తరలించడానికి లేదు, సంసార సెక్యూరిటీ వ్యవధి (చూడండి మూర్తి 10). హార్వెస్టింగ్ పరికరాలు గొట్టాల వరుస ట్యూబ్ దిగువన కుట్లు మరియు dropwise ప్రవణత కోలుకుంటున్న ద్వారా జరుగుతుంది.

విశ్లేషణాత్మక సెక్యూరిటీ ప్రోటీన్ లేదా న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం యొక్క ఈ పద్ధతులు, సంవత్సరాలలో విస్తృతంగా ఉపయోగించారు 60-70, DNA అణువుల విభజన దోపిడీకి గురవుతున్నాయి. ద్రావణంలో, వారు వాటి కూర్పుపై ఒక ఫంక్షన్ ఉంది సాంద్రత ఉంటుంది

స్థావరాలు ; గమనించిన డెన్సిటీ తేడాలు చిన్న ఉన్నప్పటికీ, వారు ఒక CsCl ప్రవణత ద్వారా వేరుగా చేయవచ్చు. లో CsCl DNA యొక్క ఒక పరిష్కారం యొక్క అసోసియేషన్ తరువాత, వారి తేలి సాంద్రత DNA అణువుల విభిన్న జనాభాలు ఉన్నాయి చాలా స్థిరంగా హద్దుల్లో ట్యూబ్ పాటు పొందవచ్చు, సంబంధం లేకుండా వారి పరిమాణంలో (విభజన పరిగణలోకి తీసుకుంటారు లేని). ఈ టెక్నిక్, కూడా ప్రత్యేక DNA కలిగి చేయవచ్చు డెన్సిటీ తేడాలు భారీ ఐసోటోప్ ఉండటం కారణంగా (బదులుగా సాధారణ 14N కలిగిన ఉదా: 15N DNA).

మూర్తి 11. అపకేన్ద్రీకరణం డెన్సిటీ ప్రవణత సమతౌల్య (autoformé ప్రవణత CsCl) నమూనా (సాధారణంగా, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు) ప్రారంభంలో లేదో స్థాపిస్తుంది దీనిలో CsCl ద్రావణంలో కరిగిపోయే, సెక్యూరిటీ సమయంలో, ఏకాగ్రత మరియు సాంద్రత యొక్క ఒక నిరంతర వాలు. అణువులు వాటి సాంద్రత ఒంటరిగా ప్రకారం బ్యాండ్లు వేరు మరియు సమతుల్యత దగ్గరే ఉంటాయి.

DR AOUATI Amel యొక్క కోర్సు – కాన్స్టాంటైన్ ఫ్యాకల్టీ